Diagnostika

Klinická imunológia a alergológia - laboratórium

Imunológia ako dynamicky sa rozvíjajúce odvetvie medicíny zasahuje svojím významom prakticky do všetkých medicínskych odborov.

Laboratórne diagnostické metódy v klinickej imunológii a alergológii prispievajú k diagnostike chorobných stavov súvisiacich s poruchami imunitného systému:

  • primárne a sekundárne imunodeficiencie
  • alergické ochorenia
  • autoimunitné ochorenia.

 

V diagnostike primárnych a sekundárnych imunodeficiencií využívame najnovšie poznatky a technológie. Ide najmä o stanovenie zastúpenia a funkčnosti bunkových populácií, ktoré sú dôležité pre správne fungovanie imunitného systému. Vyšetrenie sa realizuje metódou prietokovej cytometrie. Vo vedecko-výskumnej oblasti sme dosiahli úspechy najmä prácami týkajúcimi sa imunodeficientných stavov u pacientov s ochorením Covid-19 ako aj inými infekčnými ochoreniami a prispievame tiež k diagnostike najmä primárnych imunodeficiencií (vrátane syndrómov periodických horúčok) v úzkej spolupráci s Centrom pre vrodené poruchy imunity. 

 

Diagnostika alergických chorôb bola v minulosti doménou práce v imunologických ambulanciách a laboratóriách, ale v posledných rokoch tiež zaznamenala výrazný pokrok. Je to najmä z dôvodu využívania tzv. komponentovej diagnostiky, ktorá umožňuje vyšetrovanie alergií na molekulovej úrovni. Táto metóda výrazne prispieva k objasneniu závažnosti ochorenia, k vysvetleniu skrížených alergických ochorení a v konečnom dôsledku k výberu vhodnej imunoterapie. Aj v tejto oblasti má pracovisko významnú vedecko-výskumnú a publikačnú činnosť.  

 

Autoimunitné choroby sú ďalšou oblasťou, v ktorej laboratórna diagnostika zohráva dôležitú úlohu. Predmetom diagnostiky v imunologickom laboratóriu je najmä stanovenie širokého spektra orgánovo špecifických ako aj nešpecifických autoprotilátok rôznymi metódami.   

 

Našou víziou do budúcnosti je pokračovať vo výskumnej a publikačnej oblasti vo všetkých uvedených oblastiach s využitím nových informácií a nových diagnostických metód najmä však so zameraním na imunologicky podmienené zriedkavé ochorenia. 

 

Diagnostika

  • fenotypizácia buniek v periférnej krvi a v iných telesných tekutinách (BAL, likvor, synoviálna tekutina) metódou prietokovej cytometrie
  • test aktivácie bazofilov metódou prietokovej cytometrie
  • fagocytárna aktivita polymorfonukleárnych leukocytov metódou prietokovej cytometrie
  • stanovenie autoprotilátok v sére metódami ELISA, nepriama fluorescencia, immunoblot
  • stanovenie protilátok proti infekčným agens v sére metódou ELISA
  • stanovenie infekčných agens v rôznych biologických materiáloch metódou RT PCR
  • monitorovanie biologickej liečby (koncentrácia a protilátky v sére) metódou ELISA
  • stanovenie koncentrácie vybraných zápalových parametrov v sére chemiluminiscenčnouimunoanalýzou
  • stanovenie koncentrácie špecifických IgE proti alergénom (extraktom a komponentom) v sére metódami ELISA, immunoblot, ALEX (multiplexová metóda).

 

Transplantačná imunológia

Ústav klinickej imunológie a lekárskej genetiky JLF UK a UNM poskytuje komplexnú diagnostickú podporu pacientom pred a po transplantáciách. Naša práca je postavená na moderných technológiách, vedeckých dôkazoch a dlhoročných klinických skúsenostiach.

V spolupráci s Transplantačno-nefrologickým oddelením UNM prinášame medicínu založenú na dôkazoch (EBM) priamo do každodennej klinickej praxe.

Pred transplantáciou zabezpečujeme komplexnú typizáciu HLA antigénov I. a II. triedy u príjemcov a darcov. Využívame na to najnovšie technológie, ako je treťogeneračnésekvenovanie (Oxfordnanopore) a expresná kvantitatívna PCR (RT-PCR).

Naše diagnostické portfólio zahŕňa aj detekciu špecifických protilátok proti HLA aloantigénom, ktoré môžu po transplantácii viesť k poškodeniu darovaného orgánu. Venujeme sa tiež hodnoteniu molekulárnej imunokompatibility medzi darcom a príjemcom, čím zvyšujeme úspešnosť transplantácií.

Pre predikciu rizík využívame pokročilé algoritmy ako PIRCHE-II a Snow, ktoré kombinujú umelú inteligenciu, hlboké strojové učenie a moderné výpočtové technológie. Vďaka nim dokážeme presnejšie odhadnúť potenciálnu imunitnú reakciu organizmu.

Sledovanie voľnej mimobunkovej cirkulujúcej DNA (dd-cfDNA) v plazme pacienta nám umožňuje v reálnom čase monitorovať stav transplantovaného orgánu a včas odhaliť prípadné komplikácie.

Okrem klinickej práce aktívne rozvíjame aj vedecko-výskumnú činnosť. Skúmame prepojenia medzi donor-špecifickými protilátkami, algoritmami PIRCHE-II a Snow a hladinami dd-cfDNA, aby sme ešte lepšie pochopili imunitnú odpoveď po transplantácii a posúvali hranice personalizovanej medicíny.

V kontexte portfólia inovatívnych vyšetrení spolupracujeme aj s inými pracoviskami na celoslovenskej úrovni. 

Diagnostika:

  • typizácia low-resolution HLA antigénov I. a II. triedy (RT-PCR)
  • typizácia high-resolution HLA antigénov I. a II. triedy
    (ONT sekvenovanie)
  • skríningové vyšetrenie anti-HLA protilátok I. a II. triedy (LUMINEX, mixed)
  • špecifikácia anti-HLA protilátok I. a II. triedy (LUMINEX, SAB)
  • krížová skúška pred transplantáciou (metódou prietokovej cytometrie-FCXM/FACS)
  • stanovenie imunokompatibility medzi príjemcom a darcom (algoritmy molekulárnej imunokompatibility)
  • stanovenie donor-derivedcell-free DNA pri poškodení transplantovaného orgánu (next-generation sekvenovanie)


Lekárska genetika – diagnostika:

  • laboratórne a ambulantné výkony
  • cytogenetické vyšetrenia
  • vyšetrenie karyotypu prenatálne (z amniocytov plodovej vody a buniek choriovýchklkov)
  • postnatálne (z lymfocytov periférnej krvi ),
  • vyšetrenia fibroblastov (z buniek potratených plodov)
  • FISH diagnostiku
  • genetické vyšetrenia